糖谱分析

生物制药行业使用糖化概况分析来分析在被开发为治疗剂的糖蛋白上发现的聚糖。这也是批准前和批准后制造的糖蛋白批量释放特性的关键分析方法。

该过程可以细分如下：

• 从糖蛋白释放聚糖
• 捕获和清除释放的聚糖
• 释放聚糖的标记
• 纯化和清除标记的聚糖
• 使用MS，HPLC或CE对聚糖进行分析以产生聚糖谱

聚糖释放

通常，PNGase F用于释放N-连接的聚糖。该酶快速有效地起作用，在大多数情况下会在天然条件下裂解聚糖。Endo F酶家族也通常用于聚糖释放。这三种酶对在N-连接的聚糖上发现的多天线结构的特异性不同。它们与PNGase F的不同还在于，它们使倒数第二个聚糖（一种带电荷的N-乙酰基-葡萄糖胺）附着在蛋白质上。PNGase F和Endo F酶家族均带有适合于荧光标记的自由还原末端的聚糖。

对于O联聚糖的释放，Ludger Liberate Orela Kit可以释放具有适合荧光标记的自由还原末端的聚糖。该试剂盒非常简单，包含简单的方法，没有替代方法肼解所需的特殊处理技术。

聚糖捕获和清除

已经开发了许多用于从蛋白质，盐和去污剂中纯化聚糖的技术。

• LudgerClean EB10和EC50滤芯设计用于从蛋白质，盐和去污剂中纯化聚糖。
• LudgerClean PBM糖苷酶后净化板已经开发出来，可在MS分析之前以96孔形式去除糖苷酶。
• LudgerClean CEX柱可从非碳水化合物材料（包括盐，蛋白质和清洁剂）中纯化O-聚糖。

聚糖标签

然后，通常基于用于分析的分离/检测系统，用报告分子标记糖基。Ludger已经开发了各种健壮可靠的聚糖标记试剂盒。

荧光分子2-AB和2-AA在HPLC分析中用于聚糖分析已有多年历史，被认为是该行业的金标准。

全甲基化标记试剂盒可用于质谱分析，APTS已开发用于毛细管电泳。

普鲁卡因酰胺标记允许通过质谱或UHPLC鉴定聚糖，由于其提高的电离效率，它可以通过ESI-MS鉴定较小的聚糖（相对峰面积> 1％）。

标签清理

荧光标记后纯化聚糖样品的最可靠方法之一是使用S柱。这些采用亲水性膜将标记的聚糖与非聚糖污染物分离开来，并在糖化QC过程中常规用于生物制药行业，以批量释放FDA和EMA批准的生物制药。

T1柱是一项较新开发的技术，旨在更快，更适合高通量分析。使用我们的真空歧管系统时，整个过程在45分钟内完成 。

糖谱分析的HPLC色谱柱和缓冲液

我们提供全系列的Ludger HPLC色谱柱和专为聚糖分析开发的缓冲液。

• C2和C3阴离子交换柱和缓冲液-基于电荷的分析
• N1和N2正相色谱柱和缓冲液–通过基于大小的分析进行糖谱分析
• R1，R2和uR2反相色谱柱和溶剂–唾液酸和单糖分析

糖和糖蛋白标准品

QA-Bio还提供在糖谱分析中使用的各种定性和定量的聚糖标准品和糖蛋白标准品。所有产品均以最高的质量和纯度生产。

• 聚糖 –通过NMR和HPLC纯度超过90％
• 聚糖库 – Fetuin，IgG
• 定量标准品 –通过qNMR和q单糖分析测定
• 糖蛋白标准品 –胎球蛋白，IgG